在藥品分析實驗中,正確的操作技巧和合理的注意事項是確保實驗結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵。以下是一些常見的經(jīng)驗技巧和注意事項,希望能為您的實驗提供幫助。
1. 過濾離心法:在乙醇溶解主成分后,常常需要過濾以去除輔料。離心方法可以將輔料沉淀,取上清液。注意選擇具有塞子的離心管,若沒有則可使用柔軟的塑料薄膜袋扎橡皮筋作為塞子。使用離心機離心操作過程應(yīng)快速進行,以免乙醇揮發(fā)影響測定結(jié)果。
2. 超聲波分散:在檢驗部分藥片的含量時,使用超聲波超聲可以更容易地將片劑分散,使主成分溶解,避免浪費。相比使用研磨儀研磨轉(zhuǎn)移方法,超聲波分散對含量均勻度測定沒有影響,且更為簡便合理。
3. 控制溶劑濃度:在檢測中藥材的浸出物時,一定要按照標(biāo)準(zhǔn)控制好溶劑的濃度,如乙醇等。否則,檢驗結(jié)果可能會出現(xiàn)較大差異。
4. 對照品混合:當(dāng)液相鑒別中供試品與對照品出峰時間不一致時,無法判斷是否合格。可以將對照品與供試品按一定比例配成混合溶液后進樣,若峰寬未變寬且未出現(xiàn)駝峰,則可判斷為合格。
5. 方法建立:在進行原料殘留物檢測時,如果主藥對雜質(zhì)有干擾,現(xiàn)有方法無法檢出,需要自行建立方法。建議先考慮利用理化性質(zhì)使用過濾、離心機離心等方法將雜質(zhì)分離出來再進行測定,可能會得到意想不到的效果。
6. 薄層色譜鑒別:在藥材薄層色譜鑒別時,應(yīng)考慮展開劑的溫度和配制順序,這可能會影響色譜的結(jié)果。
7. 有機溶劑殘留量檢查:在做藥品有機溶劑殘留量檢查時,可以靈活選擇色譜柱,通常的DB-624可以滿足要求。取樣量也可以進行調(diào)整,標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度根據(jù)限度進行相應(yīng)調(diào)整。
8. 飽和時間:薄層色譜鑒別時,要確保飽和時間足夠,以免出現(xiàn)色譜結(jié)果不準(zhǔn)確的情況。
9. pH值控制:在采用HPLC法測物質(zhì)含量時,使用了緩沖鹽的流動相,一定要注意其pH值。放置過程中可能會產(chǎn)生變化,而某些藥物對這種變化非常敏感。
10. 溫度控制:在用HPLC法測物質(zhì)含量時,溫度的控制非常重要。最好使用有柱溫箱,若沒有則需裝空調(diào)保持恒溫后再測定,以避免出現(xiàn)基線飄移,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。
11. 藥物對溫度的敏感性:某些藥物品種對溫度的影響非常大。在某種品種中,對照品溶液不能放在低溫冰箱中,在液相室內(nèi)需要開著空調(diào),否則第二天的對照品到中午時也無法使用。
12. 微量移液槍的使用:在使用微量移液槍時,要注意 "重壓輕打" 的原則,以確保加液準(zhǔn)確性。
13. 提取分液:在一些乳膏的含量測定中,常常會使用提取分液。若兩相分界不清,可加少量飽和氯化鈉溶液。分層處會更加明顯。
14. 溶解時間:部分樣本的溶解速度較慢,溶解時間要稍長一些才能溶解。
15. 流動相溶解樣品:在使用HPLC法測物質(zhì)含量時,最好將樣品溶解于流動相中。否則容易產(chǎn)生干擾峰,影響結(jié)果。特別要注意是否出現(xiàn)倒峰現(xiàn)象。使用含有緩沖鹽的流動相,容易堵塞管路、柱子甚至檢測器。若檢測器堵塞,最好先不要拆卸,可以使用10%甲醇水超聲加熱沖洗,可以見到較好的效果。
16. 溫度低下的萃取:在溫度低的環(huán)境中進行中藥制劑的萃取時,常常會出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,使得兩相不容易分層。可加入少量飽和氯化鈉溶液,或者用電吹風(fēng)對分液漏斗進行加溫,或者使用熱抹布覆蓋,可以加速分層過程。
17. 試劑含水量:非水滴定中,試劑的含水量對結(jié)果有較大的影響。如果更換不同廠家的冰醋酸,實驗結(jié)果會出現(xiàn)不同的偏差。
18. 中藥制劑的溶液過濾:對于較為稠密或量較少的中藥制劑溶液,如果需要用濾紙過濾,可以先通過離心方法使之分層,再進行過濾。這樣可以加快過濾速度,減少有機溶劑的揮發(fā)(尤其是在環(huán)境溫度較高時)。
19. 含量測定中的高波長檢測:在使用高效液相色譜儀檢測人參、麻黃的含量時,由于檢測波長為邊緣波長(例如203、207nm),通常一次無法成功。特別是在使用一段時間后的檢測器。可以將色譜柱卸下,直接連接檢測器,使用0.1%鹽酸溶液清洗檢測池4小時,效果會更好一些。
20. 對照品的處理:使用高效液相色譜儀測定含量時,使用色譜純試劑處理對照品和樣品,可以減小誤差。
21. 梯度條件下的干擾峰:在HPLC檢測中,使用梯度條件容易產(chǎn)生干擾峰。為規(guī)避此問題,可以嘗試以下方法:選擇經(jīng)過重蒸后的水或市售純凈水(例如娃哈哈水)作為流動相,盡量選用高波長下的檢測,梯度程序要盡量平緩,樣品濃度選用線性范圍內(nèi)的MAX點。
通過遵守這些經(jīng)驗分享中的技巧和注意事項,可以提高藥品分析實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。希望這些經(jīng)驗對您的實驗有所幫助!
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