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流式細胞術(FCM)的優勢及應用

 更新時間:2022-11-09 點擊量:1542

流式細胞術(FCM)是一種基于激光的技術,用于生物顆粒的多參數分析。隨著技術的發展,FCM已進入許多使用領域。FCM也用于免疫表型研究。因此,它可以用于確定細胞亞群、譜系、細胞分化和激活階段以及克隆性。隨著FCM分析的發展,B細胞發育和分化的各個階段已變得可識別。此外,FCM已經開始識別和表征幾個不同B細胞亞群和相關診所中的表達譜。

流式細胞術分析血小板功能有較多優勢。它可以血小板直接在全血的生理環境中進行分析(包括紅細胞和白細胞,兩者都影響血小板活化)。樣本的簡化操作可防止人為的體外活化和血小板亞群的潛在損失。流式細胞術方法主要用于檢測血小板表面膜的特異性激活依賴性修飾譜。此外,隨著針對新功能表位的新單克隆抗體的開發,它們比較容易地并入分析中。全血流式細胞術可檢測到僅有1%部分活化血小板的亞群,只需微量(~5µL)血液,使用流失細胞儀還可以準確分析嚴重血小板減少癥者的血小板。如果抗體試劑可用,血小板的流式細胞術評估同樣適用于動物研究。此外,非物種特異性的非抗體試劑(例如,自體配體[FITC纖維蛋白原]、鈣指示劑、F-actin探針[phalloidin]、核苷酸染料[噻唑橙]、活性染料和膜聯蛋白V)等也常用在動物研究中。



流式細胞術其實是一個平臺,可在此平臺上執行數十種非常不同、高度專業化的分析,并提供同時執行許多這些分析的能力。正是這種分析的多因素性質使FACS成為當今免疫生物學的常用工具。FACS分析得出的數據具有較高的信息密度,這對于闡明極其復雜的免疫系統是可行的。20世紀以來,FACS技術一直在快速發展。這一演變包括不斷將應用程序注入臨床環境——事實上,事實上,幾乎每個現代醫院都至少有一個這樣的儀器,這一事實已經證明了FACS在診斷和預后方面的作用。目前基礎研究實驗室正在開發的化驗,據推測將在未來十年成為醫院環境中的常規化驗。

流式細胞術有助于AML亞類化,而無復發性細胞遺傳學異常。例如,根據WHO分類(FAB分類下的AML M0),根據定義,其通過細胞化學缺乏髓過氧化物酶反應性,依賴于FC建立髓系。在急性粒單核細胞白血病或急性單核細胞-單核細胞性白血病的偶發病例中,細胞化學顯示非特異性酯酶活性很低,FC可以證實單核細胞分化。FC鑒定白血病髓母細胞上的巨核細胞相關抗原,如CD9、CD36、CD41和CD61,為診斷急性巨核細胞白血病(FAB分類下的AML M7)提供了重要支持,并有助于將其與AML M0區分開來。

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