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pcr耗材會(huì)直接影響pcr檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性嗎?

 更新時(shí)間:2022-08-02 點(diǎn)擊量:1462

直接影響到pcr檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素,通常有以下幾種:

引物與模板DNA互補(bǔ)的程度、 酶的濃度、鎂離子濃度、dNTP的質(zhì)量與濃度。

還有循環(huán)次數(shù)、溫度和時(shí)間的設(shè)置,pcr實(shí)驗(yàn)設(shè)備與配套耗材等

在眾多影響因素中,pcr實(shí)驗(yàn)耗材也是影響pcr檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要因素。

用于pcr檢測(cè)的耗材類型包括:8連管、pcr管、無(wú)裙邊、半裙邊,全裙邊,深孔板孔等。這么多的耗材該如何選擇呢? 

pcr耗材多數(shù)屬于PP材質(zhì),由于這種材質(zhì)不僅有良好的化學(xué)耐性而且表面不易粘附生物分子,可耐120°C的高溫。我們常見的pcr耗材規(guī)格及體積如下:

PCR檢測(cè)

單管/聯(lián)管:0.5mL,0.2mL, 0.15mL  96孔板:0.2mL, 0.15mL

384孔板:0.04mL 。

當(dāng)樣品量比較少的時(shí)候,可選用單管或8排管。

Pcr管多數(shù)是透明的,但Qpcr實(shí)驗(yàn)中建議選用白色pcr耗材,這種材質(zhì)的耗材可良好地反射熒光信號(hào),優(yōu)化實(shí)時(shí)熒光定量pcr檢測(cè)的結(jié)果。 

在pcr板中無(wú)裙邊板適用于大多數(shù)的PCR實(shí)驗(yàn),但其移液過程中穩(wěn)定性較差不太適用于自動(dòng)化的PCR儀。

半裙邊板的移液穩(wěn)定性相對(duì)較高比較適合自動(dòng)化的應(yīng)用。

全裙邊板的移液穩(wěn)定性好,機(jī)械強(qiáng)度較好,比較適用于凸模pcr儀和自動(dòng)PCR系統(tǒng)。

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