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TFF和ATF切向流技術在生物反應器灌流培養中的應用

 更新時間:2022-06-23 點擊量:3033
TFF和ATF切向流技術在生物反應器灌流培養中的應用

目前在生物反應器中使用細胞培養技術進行生物制藥與抗體生產已逐漸成為現代制藥新技術。細胞培養關鍵工藝主要有三種即:批次培養、灌流培養、連續灌流培養。TFF和ATF切向流技術在灌流培養和連續培養工藝中應用較為普遍。

灌流培養工藝
灌流培養工藝簡單來講就是將細胞與培養基混合加入加入到生物反應器進行培養,而后通過細胞截流技術截留細胞,濾出廢棄培養基,灌注新培養基進行細胞培養的工藝過程。這種細胞培養方式比批次培養操作方便,產能及效率較高。灌流式培養工藝中細胞截留裝置多數采用微孔濾膜設計、中空纖維膜或旋轉膜裝置,用來截留流大分子產物和培養細胞。這種培養截留方式適用于大多數罐式生物反應器及懸浮培養操作。如果進行固定化細胞培養也可以使用固定床式生物反應器 ,這種反應器內部會單獨裝配固定的聚脂纖維載體培養床使細胞附著于纖維載體中進行生長,通過攪拌負壓使培養基在固定的聚酯纖維載體網籃中快速流通,提升細胞所需營養成分的補充速度和氧氣傳遞,有利于短時間提高細胞生長密度。

 

TFF和ATF切向流技術的應用
在使用傳統的微濾膜時,由于液體的流向與過濾的方向相一致,這樣會因固形物滯留堆積在濾膜表面形成的較厚的濾餅層堵塞微孔致使流速降低,因此只適合少量樣品微濾,不太適合生物反應器放大生產。而TFF切相流技術則是通過蠕動泵貨其它增壓方式改變過濾方向使其與液體流向相互垂直,從而減少過濾器堵塞風險,常見的切相流程方式有旋轉過濾切向流、旋轉切向流、使用錯流過濾器切向流等.但由于使用TFF切向流方式一般具有較大的細胞剪切力,不太適合過于脆弱的細胞。

ATF切向流技術
ATF切向流也稱為交替式切向流是將中空纖維柱、高壓空氣泵、隔膜真空泵相互連接,通過氣泵與真空泵調節壓力差,使細胞和培養基通過中空纖維柱反復交替。從而達到細胞截留在中空纖維柱內的培養的方法.利用 ATF切向流技術可以有效降低細胞剪切力,使細胞在較高灌流速度短時間獲取較高的數量細胞密度及產物產量。比較適合灌流培養及連續培養等放大生產工藝中。


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